Framställning av våt bakteriebakterie för att observera dess naturliga form och storlek

Syftar till att förbereda våtmonteringen av en bakterie, för att observera dess naturliga form, storlek och arrangemang i levnadsvillkor.

Ändamål:

Bakterieceller kan enkelt och tydligt ses när de färgas av fläckar, men i de flesta av färgprocesserna dör cellerna och förlorar sin naturliga form och storlek på grund av värmefixering samt på grund av exponering för kemikalier (fläckar, syra och alkohol).

Syftet med detta experiment är att observera den naturliga formen, storleken och arrangemanget hos bakterier i levande tillstånd. Motilitet kan inte observeras i vått montage, eftersom cellerna pressas mellan glidbanan och locket.

Princip:

I våtmonteringen placeras en droppe av bakteriesuspensionen på en glida, täckt med en täckglida och observeras under ett föreningsmikroskop eller företrädesvis under ett mörkfält eller faskontrastmikroskop med användning av oljedämpnings-mål.

Material som krävs:

Glasskiva, täckglas, petroleumgel, nedsänkningsolja (cedertullolja eller flytande paraffin), bakteriekultur (på fast medium eller i flytande suspension), slinga och mikroskop (förening, mörkfält eller faskontrast).

Procedur:

1. En slang rengörs ordentligt under kranvatten, så att vatten inte kvarstår som droppar på dess yta (Figur 5.2).

2. Sliden torkas genom att torka med bibulous papper och därefter flytta över flamma eller hålla i solen.

3. Om bakterierna har odlats på ett fast medium (som snedkultur eller plåtkultur) sätts en droppe destillerat vatten i mitten av glidbanan. En slinga steriliseras genom att värma den över en flamma till röd het. Det kyles till rumstemperatur. Därefter skrapas aseptiskt en liten del av bakteriekulturen av slingan och överförs till droppen av vatten.

En suspension av bakterier görs genom att försiktigt blanda slingan av bakterier i vattendroppen, så att droppen inte sprids. Om det odlas i ett flytande medium som suspension placeras aseptiskt en droppe av bakteriesuspensionen i mitten av gliden direkt med en flamsteriliserad slinga.

4. Petroleumgel eller liknande material appliceras kring droppen, så att när täcklocket täcker droppen minimeras evaporation och effekt av luftströmmen.

5. En skyddsplatta hålls i ett lutande läge nära droppen av bakteriesuspension med en kant som rör glidan.

6. Långsamt sänks locket till dess att det rör sig om droppens yta.

7. Därefter släpps skyddsskyddet, så att dropp av bakteriesuspension sprider sig i alla riktningar under locket. Försiktighet bör vidtas, så att ingen luftbubbla bildas i suspensionen.

8. Bildskärmen klipps på scenen av ett sammansatt mikroskop och observeras med låg effekt och höga torrmål. Därefter sätts en droppe nedsänkningsolja på täcklocket och observeras med hjälp av oljedämpningsobjektet för mikroskopet. Företrädesvis bör ett faskontrast- eller mörkfältmikroskop användas för tydlig observation.