Användbara anteckningar om enzympapain och enzympepsin
Immunoglobuliner är proteiner och är i allmänhet resistenta mot matsmältning med enzymer.
Emellertid klibbar enzymet papain och pepsin immunoglobulinmolekylerna. Fragmenten som alstras av papain och pepsin är användbara för studier av immunoglobulinstruktur och -funktioner. Men klyvningsställena för dessa två enzymer är olika (Figur 9.5).
Fig. 9.5: Schematiskt diagram över proteolytisk fragmentering av immunoglobulin genom kort behandling med enzymer papain och pepsin.
Enzymapain klyver immunoglobulinet vid den N-terminala sidan av den inter-tunga kedjedisulfidbindningen och producerar tre fragment (två Fab-fragment och ett Fc-fragment). Enzympepsin klyver immunoglobulinet vid den C-terminala regionen och producerar ett stort fragment (som innehåller två Fab-regioner) som kallas F (ab ') 2 . De återstående tunga kedjorna på den C-terminala sidan smältes i flera små peptider
1. Enzym Papain:
Enzymapain klyver gångjärnsregionen på den N-terminala sidan av de inter-tunga kedjedisulfiderna och detta resulterar i bildandet av tre fragment. (Två fragment innehållande den variabla regionen och ett fragment innehållande CH2- och CH3- regionerna). De två fragmenten som innehåller den variabla regionen kallas; Fab-fragment, (dvs fragment-antigenbindning) eftersom de har antigenbindande ställen.
Det tredje fragmentet innefattar de karboxyl-terminala delarna av båda tunga kedjorna ihophållna av disulfider. Generellt är strukturen hos det tredje fragmentet identiskt för många olika immunglobulinmolekyler.
Därför kan fragment av dessa typer kristalliseras även om de består av många olika immunoglobulin s. Så kallas detta fragment det kristalliserbara fragmentet eller Fc-fragmentet. De flesta av immunoglobulins sekundära biologiska egenskaper beror på sekvenserna i Fc-regionen. Även detta är regionen som kännetecknas av Fc-receptorerna på många celltyper.
2. Enzympepsin:
Enzympepsin klyver immunoglobulinet på den karboxi-terminala sidan av gångjärnsregionen vilket resulterar i ett stort fragment som kallas F (ab ') 2 . F (ab ') 2 har två Fab-fragment kopplade med disulfidbindningar. Fc-regionen försämras i stor utsträckning av pepsin och vanligtvis saknas inget intakt Fc-fragment efter pepsin-digestion.
