Genkloning: Stora steg involverade vid kloning av ett gen
Genkloning: Stora åtgärder involverade vid kloning av ett gen!
"Somatic cell nuclear transfer" eller "kärnöverföring", det kräver två typer av celler. Den ena är en somatisk cell, som samlas in från djuret som ska klonas, vilket den vanligaste kloningsmetoden är känd som "genetisk givare".
En somatisk cell är vilken som helst annan cell än en spermiecell eller äggcell, och innehåller det fullständiga DNA, eller genetisk ritning, av djuret det kom ifrån. För kloningsändamål erhålls somatiska celler typiskt genom en rutinmässig hudbiopsi utförs av en veterinär.
Cell som krävs för kloning är en äggcell, som samlas in från en kvinna av samma art (kallad "äggdonatorn"). I laboratoriet extraherar en forskare och kasserar äggcellerna, vilket är den del av cellen som innehåller äggdonatorns gener. En infogar sedan den somatiska cellen från den genetiska givaren i ägget och "säkringar" de två med el. Följaktligen innehåller smält ägg den genetiska givarens DNA.
Den vetenskapliga simuleringen av det smälta ägget aktiverar ägget och orsakar att det splittras precis som ett ägg skulle, om det hade befruktats av en spermacell i konventionell reproduktion. Det aktiverade ägget placeras sedan i ett odlingsmedium. När celluppdelning fortsätter under flera dagar bildar en blastocyst (tidigt embryo).
Efter en vecka överför en embryoöverföringsspecialist blastocysten till en mottagande kvinna (ibland kallad "surrogatmamma") där den fortsätter att utvecklas. Efter en fullfristig graviditet ger mottagaren ett djur som i huvudsak är identisk tvilling av den genetiska givaren.
De viktigaste stegen involverade i kloning av en gen är:
(i) Framställning av bärar-DNA (vektor-DNA).
(ii) Isolering av den önskade genen.
(iii) Infogning av den isolerade genen i vektorn som resulterar i rDNA.
(iv) Transformation av rDNA till en lämplig värd.
(v) Uttryck av rDNA som är klonad gen.
Färgad bild 7.1 (a), (b), (c), (d) och (e) visar bildandet av Dolly. Celler som tagits från yver av en Finn Dorset-ost placeras i en kultur med mycket låga koncentrationer av näringsämnen. Således svälter cellerna att dela upp och stänga av sina aktiva gener.
De två cellerna placeras bredvid varandra och en elektrisk puls får dem att smälta ihop som tvålbubblor. En andra puls efterliknar energisprängningen vid naturlig befruktning, hoppa-start celldelning. Efter ungefär sex dagar implanteras det resulterande embryot i livmodern hos en annan Blackface-ägg.
Efter en graviditetsperiod, föder den gravida Blackface-ängan ett barn Finn Dorset-lamm, namnet Dolly som är genetiskt identiskt med den ursprungliga donatorn. Den man-opererade processen att extrahera DNA från en värdcell och implantera den för att fungera i en annan typ av cell.
