Experiment för att utföra grundläggande färgning av bakterier för att observera dess form, storlek och arrangemang

Syfte att utföra enkel grundläggande färgning av bakterier, för att observera dess form, storlek och arrangemang.

Ändamål:

Det är inte möjligt att observera den naturliga formen, storleken och arrangemanget hos bakterier genom grundfärgning, eftersom dessa egenskaper förvrängs genom värmefixering.

Dessutom är vissa bakterier (t.ex. spirilli) svåra att färgas.

Sålunda utförs negativ färgning av två skäl enligt följande:

(en) Att observera bakteriens naturliga form, storlek och arrangemang, eftersom ingen värmfixering görs här.

(B) Att observera de bakterier som är svåra att färgas?

Princip:

Bakterieceller bär negativ laddning på sin yta, på grund av vilken de omges av katjoner, såsom Na + och K + (Figur 5.9). Vid sur färgning används en sur fläck, vilken joniserar i en anjonisk kromogen (negativt laddad färgämnejon) och en katjon.

De negativt laddade kromogenerna avstötes av ytan negativa laddningar på bakteriecellerna, på grund av vilka färgämnet inte kan penetrera cellen. Nu är de obestämda cellerna lättskådliga mot den färgade bakgrunden.

Material som krävs:

Slides, slinga, sura fläckar (eosin / nigrosin), buljong / platta / snedkultur av bakterier, mikroskop, nedsänkningsolja.

Procedur:

1. En slang rengörs ordentligt under kranvatten, så att vatten inte kvarstår som droppar på dess yta (Figur 5.10).

2. Det vidhäftande vattnet torkas ut med bibulous papper och glidret lufttorkas.

3. En liten droppe av den sura fläcken (nigrosin / eosin) placeras nära ena änden av bilden.

4. En slinga steriliseras över flamma och kyls. Aseptiskt överförs en slinga av bakterier från agarplattan eller en slang eller en slinga av bakteriens suspension från en flytande buljong till droppfläcken. En suspension av bakterier i fläcken görs genom att försiktigt blanda slingan av bakterier i droppfläcken, på ett sådant sätt att droppen inte sprids.

5. En annan ren glid hålls i en vinkel på 30 ° till den första gliden, på ett sådant sätt att en smal kant av den förstnämnda berör ytan av den senare mot änden utan fläckdroppen.

6. I den lutande positionen dras den andra gliden framåt mot fläckdroppen tills dess kant bara rör droppen och droppen sprids utmed sin kant.

7. I det lutande läget trycks den andra gliden bakåt för att bilda en tunn smet av bakterier.

8. Smetret lufttorkas. Värmefixering görs inte här.

9. Glidskäret klipps till mikroskopets stadium och smetet observeras under låg effekt och höga torrmål.

10. En droppe nedsänkningsolja sätts på smeten.

11. Smetet observeras under olje-nedsänkningsmål.

Observationer (under oljedämpningsmål):

1. Formen av bakterier:

Sfärisk (coccus)

Stångformiga (baciller)

Komma-liknande (vibrio)

Spiral (spirochetes)

2. Arrangemang av bakterier:

Par (diplobacillus / diplococcus)

I fyra (tetrads)

I kedjor (streptokocker / streptobacillus)

Druvliknande kluster (stafylokocker)

Cuboidal (sarkina eller oktett)

3. Storlek på bakterier:

Genom ögonuppskattning gör teckning av fältet under oljedämpningsmål.