Koagulastest på bakterier för att ta reda på deras förmåga att koagulera blod (med figur)

Koagulastest på bakterier för att ta reda på deras förmåga att koagulera blod (med figur)!

Princip:

De patogena stammarna hos bakterierna Staphylococcus innehåller enzymkoagulasen, som verkar inom, värdvävnader för att omvandla fibrinogen till fibrin.

Fibrinmaskningen som bildas omger bakteriecellerna eller de infekterade vävnaderna, skyddar bakterierna från icke-specifika värdmotståndsmekanismer, såsom fagocytos och anti-stafylokockaktiviteten hos normalt serum.

Detta enzym hjälper också till vid koagulering av blod i värden genom att vara en föregångare till trombinliknande substans som koagulerar eller blockerar blod. Koagulas-testet utförs för att skilja mellan koagulaspositiv (patogen eller virulent)) och koagulas-negativ (icke-patogen eller avirulent) Staphylococcus.

I koagulastestet blandas en suspension av testarten av Staphylococcus med blodplasma och det inokulerade plasman undersöks sedan periodiskt för fibrinbildning eller koagulering.

Klotbildning inom fyra timmar tolkas som ett positivt resultat och indikerar en virulent (patogen) Staphylococcus-stam. Frånvaron av koagulering efter 24 timmars inkubation är ett negativt resultat, vilket indikerar en virulent (icke-patogen) stam.

Material som krävs:

Laboratoriedjur (kanin eller marsvin), spruta, antikoagulant (natriumcitrat eller heparin), bloduppsamlingsrör, centrifug, provrör, glid, inokuleringsslinga, bunsenbrännare, laminärflödeskammare, kassera burk, isolerade kolonier eller rena bakteriekulturer av släktet Staphylococcus.

Procedur:

1. Sprutan och bloduppsamlingsrören tvättas med lösning av natriumcitrat eller heparin för att förhindra koagulering av blod omedelbart efter samling (Figur 7.24).

2. Med hjälp av sprutan samlas blod från laboratoriedjur som kanin eller marsvin och sätts in i uppsamlingsrören.

3. Blodet centrifugeras vid 3000 rpm i 15 minuter i en centrifug.

4. Supernatanten (plasma) samlas in i ett annat citrerat provrör och resten (blodceller) kasseras.

(a) Slide Metod:

1. Två droppar av en suspension av testbakterierna som tillhör släktet Staphylococcus, läggs på två lika uppdelade halvor av en glid med hjälp av en inokuleringsslinga. En droppe används som "kontroll" för att se om bakterierna själv är i klumpar och den andra droppen används som "test".

2. Till "testfallet" tillsättes en droppe uppsamlad plasma, blandas och inkuberas vid rumstemperatur.

3. Dropparna observeras med timmeintervaller upp till 4 timmar.

(b) rörmetod:

1. Två små provrör tas. Ett provrör är märkt "test" och den andra "kontrollen". I varje provrör tas 0, 5 ml av bakteriesuspensionen.

2. Till "test" -röret tillsätts 1 ml plasma, blandas och inkuberas

3. Rören observeras med timmeintervaller upp till 4 timmar.

observationer:

1. Klumpar bildas: Coagulas-positiv Staphylococcus.

2. Klumpar bildas inte: Koagulas-negativ Staphylococcus.